Yüksek Performanslı Sıvı Kromatografisi / Yüksek Basınçlı Sıvı Kromatografisi (HPLC)

Yüksek Performanslı Sıvı Kromatografisi / Yüksek Basınçlı Sıvı Kromatografisi (HPLC)

     

Marka ve Model: Shimadzu-Prominence LC-20A

Teknik Özellikler:
Dedektörler:
Refraktif İndeks Dedektörü (RID)
     Refraktif indeks aralığı: 1-1.75 RIU
     Gürültü seviyesi: 2.5 x 10-9 RIU
     Çalışma sıcaklığı: 4-35 oC
Foto Diyot Dizi Dedektörü (DAD)
     Spektrum aralığı: 190-800 nm
     Gürültü seviyesi: 0.6 x 10-5 AU
     Döteryum ve Tungsten lamba
Floresans Dedektör (FLD)
     Spektrum aralığı: 0.2-750 nm
     Spektral bant genişliği: 20 nm
     Dalga boyu doğruluğu: ±0.2 nm
     Ksenon ve Cıva Lamba

Kolonlar:
CN-3 (250 mm x 4.6 mm x 5 µm)      Pinnacle II PAH 4 µm 250 x 4.6 mm
C8-3 (250 mm x 4.6 mm x 5 µm)      Inertsil Sil 100A 5 µm 4.6 x 250 mm
Inertsil NH2 (5 µm 4.6 x 250 mm)      Syrcronics Silica 250 x 4.6 5 µm
Inertsil ODS-4 (5 µm 4.6 x 250 mm)      PL gel 5 µm 100A 300 x 7.5 mm
ACE 5 C18 (250 x 4.6 mm id)      Inertsil ODS-3 4.6 x 250 mm 5 µm

Genel Tanımı:
HPLC, analitik ayırma teknikleri amacıyla en yaygın kullanılan cihazdır. Yaygın kullanılma sebepleri arasında duyarlılığı, kantitatif tayinlere kolaylıkla uyarlanabilir olması, uçucu olmayan veya sıcaklıkla kolayca bozunabilen bileşiklerin ayrılmasına uygunluğu bulunmaktadır. En önemlisi ise sanayinin, birçok bilim dalının ve toplumun birinci derecede ilgilendiği maddelere geniş bir şekilde uygulanabilirliğidir.

Yüksek basınçlı sıvı kromatografisi, gıda- içecek endüstrisi, çevre mühendisliği, kimya, ziraat, ilaç bilimi gibi çeşitli alanlarda kimyasal ayırım, saflaştırma, tespit etme ve miktar belirleme amacıyla kullanılır.

HPLC, günümüzde birçok alanda vazgeçilmez bir araç olarak kabul edilmekte ve çeşitli organik, inorganik ve biyolojik numunelerdeki türleri ayırmak ve tayin etmek için kullanılmaktadır.

Yüksek performanslı sıvı kromatografi, kimyasal ve biyokimyasal karışımların, bileşimlerinin katı fazda tutunma yeteneklerine göre ayrılması, tanımlanması ve miktarlarının belirlenmesine dayalı bir tekniktir.

Analiz Profili:

  • Organik asit bileşimi
  • Tokoferol
  • HMF
  • C Vitamini
  • Antosiyanin
  • Polisiklik Aromatik Hidrokarbon
  • Şeker Analizleri
  • Fenolik Madde
  • Aflatoksin
  • Aminoasit vb.

Şekil 1. Polisiklik aromatik hidrokarbon standardına ait kromatogram
 

HPLC’nin Başlıca Kullanıldığı Alanlar:

  • Gıda maddeleri (Suni tatlandırıcılar, antioksidanlar, aflatoksinler, katkı maddeleri)
  • Kirleticiler (Pestisitler, herbisitler, fenoller, PCB’ler)
  • İlaçlar (Antibiyotikler, sedatifler, steroidler, analjezikler)
  • Biyokimyasallar (Amino asitler, proteinler, karbonhidratlar, lipidler)
  • Endüstriyel kimyasallar (Çok halkalı aromatikler, yüzey aktif maddeleri, iticiler, boyalar)
  • Klinik tıp (Safra asitleri, ilaç metabolitleri, üre özütleri, östrojenler)
  • Uyuşturucular (Uyuşturucu ilaçlar, zehirler, kan alkolü, narkotikler)